rHSG基因调控COPD大鼠气道成纤维细胞增殖凋亡

摘要：

目的 采用脂质体介导携带大鼠增殖抑制基因(rHSG)的真核表达载体,转染至COPD模型大鼠气道成纤维细胞,为干预COPD的气道成纤维细胞增殖,打下基因治疗基础.方法 构建真核表达载体pEGFP-N1,对重组质粒pEGFP-rHSG进行鉴定并测序;采用阳离子脂质体将重组质粒pEGFP-rHSG转染至COPD模型大鼠气道成纤维细胞,分别感染24和48 h及3、5和7d后,用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测rHSG mRNA的不同时段表达水平,MTT、流式细胞仪检测转染后成纤维细胞增殖及凋亡.结果 证实重组质粒pEGFP-rHSG构建成功.转染24 h,rHSG mRNA表达量开始增加,7d达到高峰,各转染组间rHSG mRNA表达差异显著(P＜0.05);转染48 h后rHSG基因转染组成纤维细胞的增殖抑制明显低于未转染组成纤维细胞(P＜0.05);转染后48 h凋亡开始,与模型对照组相比,随着时间延长,凋亡逐渐增加,7d时凋亡率达最大(P＜0.05).结论 外源性rHSG基因介导,能够使气道成纤维细胞的增殖受到抑制并诱导其凋亡.

关键词：慢性阻塞性肺疾病、气道重塑、气道成纤维细胞、大鼠增殖抑制基因

所属期刊栏目：33

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然基金地区科学基金81060319;贵州省科学技术基金黔科合基字[2008I 2177号]

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1235-1241