优化明胶酶谱法检测自发性高血压大鼠血浆MMP-2和MMP-9活性

摘要：

目的 以优化明胶酶谱法检测自发性高血压大鼠(SHR)血浆基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与-9 (MMP-9)的活性.方法 以含明胶的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳酶谱法为基础,改变孵育时间、工作液成份,采用不同pH值的孵育液及不同冻融次数的样品,观察对基质金属蛋白酶(MMPs)活性的影响.并以优化的酶谱法检测Wistar及自发性高血压大鼠血浆MMPs的相对活性.结果 凝胶孵育时间由42 h缩短为17 h不影响酶谱法检测结果.省略漂洗步骤及洗脱液仅使用2.5％ Triton X-100、孵育液中去除NaN3及NaCl且电泳后步骤将去离子水更换为蒸馏水也不影响实验结果.孵育液pH值在7.2～8.8范围内均可用于酶谱法.血浆样品反复冻融多达6次不影响酶谱法检测结果.用优化的酶谱法检测结果显示,与Wistar大鼠相比,SHR大鼠血浆MMP-2与MMP-9活性显著增高.结论 优化酶谱法与常规方法相比更为简便经济,检测大鼠血浆MMP-2与MMP-9活性所得结果一致.

关键词：明胶酶谱、基质金属蛋白酶、高血压

所属期刊栏目：33

分类号：R363.1;R544.1(病理学)

资助基金：2011年中国医学科学院微循环研究所公益性科研院所基本科研业务费专项基金

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：845-848