肠道病毒71型的全长cDNA感染性克隆的构建与鉴定

摘要：

目的 构建一株肠道病毒71型的全长cDNA克隆并验证感染性.方法 用长片段高保真RT-PCR方法扩增肠道病毒71型87-2008 Xi'an株的cDNA,装入pBR322载体.将该克隆线性化,体外转录后转染RD细胞后,通过观察CPE及RT-PCR验证其感染性.随后利用空斑法测定拯救病毒的一步生长曲线.结果 成功构建了肠道病毒71型87-2008 Xi'an株的全长cDNA克隆；体外转录及转染RD细胞60 h后可观察到明显的CPE现象；RT-PCR在转染RD细胞中检测到病毒的存在；成功利用空斑法测定了拯救病毒的一步生长曲线,最大滴度达到2×107 pfu/mL.结论 成功构建了肠道病毒71型87-2008 Xi'an株的全长cDNA克隆并验证了其感染性,同时测定了拯救病毒的一步生长曲线,与野生型病毒相近.

关键词：肠道病毒71型、感染性克隆、一步生长曲线

所属期刊栏目：33

分类号：Q939.47(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金31071203

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：840-844