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HCV核心蛋白抑制SFRP1基因启动子活性

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目的 探讨HCV核心蛋白对Wnt信号通路抑制分子SFRP1启动子活性的影响.方法 以人肝癌细胞系Huh7基因组为模板,扩增SFRP1启动子区不同片段(-407~-27bp,-837~-27 bp,-1 202~-27bp,-1 619~-27 bp,-2 029~-27 bp),以pGL3-Basic为载体分别构建SFRP1启动子区截短报告质粒.将构建好的质粒与pRL-TK共转染HEK293细胞,确定启动子区活性最强区域;分别用编码HCV核心蛋白的腺病毒或GFP对照腺病毒感染已转染重组报告质粒的SK-Hep1细胞,观察AdCore对SFRP1启动子活性的调控作用.结果 SFRP1启动子区域-407~-27 bp片段活性最强;与pGL3-Basic对照组相比较,相对荧光素酶活性增加了37.31 ±4.45倍(P<0.01),pGL3-S2~S5的活性分别增加了28.74±2.47、13.56 ±2.52、12.97±0.87和8.29±0.09倍(P<0.01);HCV Core蛋白能够抑制SFRP1基因启动子区活性,其对pGL3-S1的抑制作用最强,与GFP对照组相比较,抑制率为63.8% ±1.0% (P<0.01).结论 HCV核心蛋白通过抑制SFRP1启动子区活性下调SFRP1基因的表达,可能参与Wnt/β-catenin信号通路的活化,并与原发性肝癌的发生密切相关.

SFRP1、启动子、荧光素酶报告基因载体、HCV核心蛋白

33

R373.21;R394.3(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))

国家自然科学基金31171307,30972586

2013-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

406-411

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基础医学与临床

1001-6325

11-2652/R

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2013,33(4)

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