cPKCγ在HPC抗N2a细胞OGD损伤中作用及其分子机制

摘要：

目的 在离体细胞水平,探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)对抗小鼠成神经瘤细胞(N2a)氧糖剥夺(OGD)损伤中作用及其可能的细胞分子机制.方法 建立N2a细胞HPC和OGD模型,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、原位末端标记(TUNEL)和蛋白印迹(Western blot)几种方法,分别检测N2a细胞损伤、坏死、凋亡和自噬水平.结果 OGD2和4h可使N2a细胞的生存率显著降低、死亡率明显增高(P ＜0.05,n=6)；HPC(20 min)明显改善OGD 3 h对N2a细胞的损伤作用,而cPKCγ抑制剂Go6983(6 nmoL/L)则显著解除HPC对OGD细胞的保护作用(P ＜0.05,n=16);OGD3h明显增加N2a细胞的凋亡数目(P＜0.05,n=6),但HPC和Go6983+ HPC均不能明显影响OGD细胞凋亡水平；OGD 3 h显著提高N2a细胞的自噬水平,Go6983和HPC+ Go6983均可明显降低OGD细胞的自噬水平(P ＜0.05,n=6),而HPC则对OGD细胞的自噬水平无明显影响；HPC明显改善OGD 3 h致N2a细胞坏死的程度,而Go6983则可解除HPC的保护作用(P＜0.05,n=16).结论 在离体细胞水平证实了cPKCγ在HPC改善N2a细胞OGD损伤中的作用,且这种作用主要与降低OGD细胞的坏死水平有关.

关键词：低氧预适应(HPC)、氧糖剥夺(OGD)、细胞凋亡、细胞自噬、细胞坏死

所属期刊栏目：33

分类号：R339.5(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金31071048,31171147;国家重点基础性研究项目2012CB18200;科技部973计划前期研究专项2011CB512109

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：308-313