结核分枝杆菌EIS基因抑制人肺腺癌A549细胞自噬
目的 构建结核分枝杆菌EIS基因表达质粒,探讨其对人肺腺癌A549细胞自噬的影响.方法 采用PCR技术扩增EIS基因片段并插入空载质粒pcDNA3.1-3flag中,双酶切、测序鉴定克隆质粒的正确性；将重组质粒与对照空载质粒分别与自噬体荧光表达质粒GFP-LC3共转染细胞并以自噬诱导剂雷帕霉素处理,荧光显微镜下观察自噬荧光并计数,Western blot检测EIS蛋白及自噬蛋白LC3Ⅱ/I的表达水平.结果 成功构建EIS基因重组表达质粒PcDNA3.1-EIS-3flag,该质粒共转染细胞组自噬荧光小点较对照组明显减少(P＜0.05),重组质粒表达42 ku看到蛋白并可抑制自噬蛋白表达水平.结论 结核分枝杆菌EIS基因可抑制A549细胞自噬的形成,其抑制作用与结核分枝杆菌持留性相关.
结核分枝杆菌、EIS基因、自噬
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R37;R392;R52(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家自然科学基金30972582,30500428;重庆市自然科学基金CSTC2009BB5276
2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
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