GATA-4过表达增加大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞
目的 研究GATA-4转染骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌细胞及表达心肌细胞特异性标志物的能力.方法 分离培养MSCs及心肌细胞(CM).第3代MSCs转染GATA-4基因(MSCGATA-4)并通过实时定量聚合酶链反应(PCR)、Western blot和免疫组化鉴定GATA-4的表达.MSCGATA-4与CM嵌套式共培养1周,通过real-time PCR和Western blot检测其心肌基因BNP、α-actinin和Islet-1的表达,用免疫组化观察α-actinin的表达.与CM混合共培养后1周后,观察MSCs的搏动情况,并用流式细胞仪检测心肌分化率.结果 MSCGATA-4组GATA-4的表达明显高于对照组(只表达GFP).MSC与CM嵌套式共培养后,MSCGATA-4组的BNP、α-actinin和Islet-1的mRNA和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05).混合共培养后,可见部分MSCGATA-4的搏动,同时部分MSC的α-actinin染色阳性.用流式细胞仪检测心肌分化率,MSCGATA-4组的心肌分化率明显高于对照组(P<0.05).结论 GATA-4过表达可以增加MSCs分化成心肌样细胞,高表达BNP、α-actinin和Islet-1.
骨髓间充质干细胞、心肌细胞、GATA-4、共培养
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R541.4(心脏、血管(循环系)疾病)
国家自然科学基金81100173,81070139;江苏省普通高校研究生科研创新计划CXZZ11_0118;江苏省医学创新团队与领军人才项目LJ201140
2013-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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