小鼠外周组织时钟基因启动子区甲基化分析

摘要：

目的 应用一种简单快速经济的方法检测8个主要时钟基因PER1、PER2、CRY1、CRY2、CLOCK、NPAS2、BMAL1和BMAL2启动子区甲基化状态,检测小鼠外周组织肝、心、肾、胸腺、睾丸时钟基因启动子区甲基化状态.方法 用偏重亚硫酸氢钠和对苯二酚对基因组DNA进行修饰.修饰后的DNA为模板,两套不同的引物对:甲基化特异性引物对和非甲基化特异性引物对扩增小鼠肝、心、肾、胸腺、睾丸组织时钟基因启动子区.PCR产物进行电泳和测序.结果 扩增产物与预期片段大小相符合.PCR产物经过直接测序进一步证实小鼠外周组织时钟基因启动子区均为非甲基化状态.结论 建立了一种检测小鼠时钟基因启动子区甲基化的新方法,借此证明成年小鼠5个外周组织8个时钟基因启动子区均呈非甲基化状态.

关键词：时钟基因、启动子、甲基化特异性PCR

所属期刊栏目：32

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家重点基础性研究项目973项目2011CBA00408;国家自然科学基金81071011;教育部新世纪人才计划NCET-10-0013

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1118-1125