P53 shRNA对肝癌细胞增殖的影响

摘要：

目的 观察用RNA干扰(RNAi)下调SMMC-7721人肝癌细胞系P53表达后对细胞增殖及P21蛋白表达的影响.方法 设计合成P53基因的短发夹RNA(shRNA),并构建pGPU6/GFP/Neo-P53 shRNA重组质粒.重组质粒转染SMMC-7721细胞,经G418抗性筛选获得阳性克隆.克隆形成实验观察细胞的增殖,RT-PCR法及Western blot 法分别检测P53、P21的mRNA及蛋白表达.BALB/c裸鼠皮下注射SMMC-7721细胞,建立移植瘤模型,瘤部位多点注射pGPU6/GFP/Neo-P53 shRNA,观察瘤体积变化和瘤重.结果 P1、P2、P33条P53 shRNA均可明显降低P53mRNA水平(P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01)；干扰P53表达明显升高SMMC-7721细胞克隆形成率(P＜0.05),P21mRNA和蛋白的表达均随着P53的沉默而显著降低(P＜0.05).P53 shRNA明显增加裸鼠移植瘤的体积和重量(P＜0.05).结论 shRNA干扰P53基因可抑制P53和P21蛋白表达,使癌细胞恶性增殖.

关键词：RNA干扰、P53、P21、肝癌

所属期刊栏目：32

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金30672363,30950028;广西研究生教育创新计划2009105981007D25

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：354-358