错配修复基因hMLH1启动子萤光素酶报告基因载体的构建与鉴定
目的 构建含hMLH1启动子片段的萤光素酶报告基因载体,并检测其在雌激素诱导下的转录活性.方法 以正常人基因组DNA为模板,PCR扩增hMLH1启动子片段(-1 953/+53),插入萤光素酶报告基因载体pGL3-Basic,将重组质粒转入HEK293细胞,检测在有和无雌激素诱导下萤光素酶的活性变化.结果 酶切和测序结果证实重组萤光素酶报告基因载体pGL3-Promoterl-luc构建成功.转染pGL3-Promoterl-luc后,雌激素诱导的萤光素酶活性为7.45 ±0.81,显著高于无水乙醇组的3.28 ±0.19(n =3,P<0.001).结论 hMLH1启动子片段存在与雌激素相关的调控序列.
错配修复基因、hMLH1、启动子、雌激素、双萤光素酶报告基因
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R57(消化系及腹部疾病)
国家自然科学基金81072041;医学分子生物学国家重点实验室专项经费2060204
2013-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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