重组腺病毒Ad-hBNP的构建及其在CHF大鼠中的分布与表达

摘要：

目的 构建重组腺病毒Ad-hBNP,观察其在CHF大鼠体内的分布与表达,为腺病毒介导BNP治疗慢性心力衰竭奠定实验基础.方法RT-PCR法从人心肌组织获得hBNP片段,应用AdEasy腺病毒载体系统,构建Ad-hBNP;CHF成模大鼠24只,随机分为4组,18只单次腹腔注射Ad-hBNP后,均分为1、4和7d组；余不予Ad-hBNP,为0点组.实验动物于相应时间处死,ELISA检测血清hBNP水平,免疫组化检测各脏器hBNP表达,RT-PCR检测各组织hBNP mRNA表达.结果成功构建用于实验性基因治疗的Ad-hBNP,纯化后滴度达到4.4×1012VP/mL.透射电镜观察Ad-hBNP呈多面体结构,颗粒直径在90 nm左右.单次腹腔注射Ad-hBNP,CHF大鼠心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏及小肠均检测到hBNP表达,外源hBNP在CHF大鼠体内的表达至少可持续7天.结论腺病毒介导的外源hBNP基因可在CHF大鼠多脏器中得到有效表达,其生物学效应时间显著长于BNP的生物半衰期.

关键词：B型利钠肽、腺病毒、慢性心力衰竭、基因治疗

所属期刊栏目：32

分类号：R541.61(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：天津市卫生局项目07KY01

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：31-35