简易高效分离培养大鼠胸主动脉血管内皮细胞方法的建立
目的 建立一种高效分离、培养大鼠胸主动脉血管内皮细胞的方法.方法 用Wistar大鼠(200 ~ 250 g),无菌条件下开胸取胸主动脉,去除血管外膜,制备长约1.0~1.5 mm动脉环.将血管环垂直置于干燥的培养皿中,并向血管环内加入含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养液、静止培养;24h血管环贴壁后,加入培养液;3~4d内皮细胞长出,弃血管环,并经0.25%胰蛋白酶消化传代.用形态学、免疫细胞化学及流式细胞分析等方法,鉴定血管内皮细胞标志物,vWF的表达.结果 培养3~4d时有细胞自主动脉环内迁移出并贴壁生长,细胞汇合后呈现典型的“铺路石”样内皮细胞特征;免疫组化和流式细胞分析结果示,vWF表达阳性率可高达98.3%±0.2%.结论用改良的植块培养方法,不需要胶原及内皮细胞生长补充物,较传统酶消化法更为经济、高效,且简便易行,适用于细小血管内皮细胞的分离与培养.
内皮细胞、胸主动脉、大鼠
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R339.5(人体生理学)
国家自然科学基金30871219;国家重点基础性研究项目2006CB5041;北京市教育委员会科技计划重点项目KZ200810025012;北京市属高等院校人才强教计划项目京教人[2008]17号;北京市新世纪百千万人才工程培养经费08-016;教育部高等学校博士点科研基金20091107110001
2013-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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