催产素体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化
目的 探索催产素(OT)体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的可行性.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养MSCs,应用OT定向诱导,相差显微镜观察细胞形态学变化,应用免疫细胞化学、激光扫描共聚焦显微镜技术检测结蛋白,α-横纹肌肌动蛋白、心肌特异性肌钙蛋白T的表达;以半定量RT-PCR方法在诱导后7、21和28 d检测细胞心肌早期转录因子GATA-4和心肌特异性肌凝蛋白重链α-MHC的表达.结果 体外分离培养的细胞生长稳定,增殖较快,主要为纺锤形和成纤维细胞状.诱导后1周,细胞以梭形、柱状为主,部分细胞有分支,核卵圆形、居中,类似心肌细胞形态,排列方向渐趋一致.诱导后4周,细胞形态变长、增大,多呈杆状,紧密平行排列生长.分化后细胞结蛋白、α-横纹肌肌动蛋白和肌钙蛋白T均呈现阳性表达.激光共聚焦扫描显微镜观察:可见细胞质内结蛋白的表达呈红色,肌钙蛋白T的表达呈绿色,当两者同时被观察时可见其共表达的部位变成黄色.RT-PCR结果显示,GATA-4于诱导后7d弱表达,21 d表达增强,28 d表达减弱.α-MHC在诱导后7d不表达,21 d弱表达,28d表达明显.结论 骨髓间充质干细胞在OT诱导下可定向分化为心肌样细胞.
骨髓间充质干细胞、催产素、心肌细胞、细胞分化、大鼠
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R331.31(人体生理学)
2013-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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