应用于双向电泳技术的不同软骨蛋白提取方案对比

摘要：

目的 探索可兼顾双向电泳凝胶图像质量和结果保真性的软骨蛋白提取方案.方法 取股骨髁软骨(n=17).分别用软骨组织直接提取总蛋白(软骨组织组)、软骨组织提取总蛋白后CPC处理(软骨+CPC组)、直接分离软骨细胞提取总蛋白(直接软骨细胞组)或培养软骨细胞提取总蛋白(培养软骨细胞组)同步进行2-DE,对比不同方案产生凝胶图像质量和结果保真性的差异.结果 软骨组织组不能形成等电聚焦.软骨+CPC组可形成等电聚焦,但蛋白点数量偏少.直接软骨细胞组可获得与培养软骨细胞组媲美的高质量等电聚焦和凝胶图像,且在高分子量和偏碱区域分离出培养软骨细胞组缺如的部分蛋白点,质谱结果显示这些蛋白分别为Ⅵ型胶原、TGF-β2和annexin等骨关节炎病因学相关蛋白.结论 从软骨组织直接提取软骨细胞用于2-DE的方案在解决等电聚焦难题的同时,还避免了细胞培养对实验结果保真性的影响,是软骨相关疾病样本的2-DE研究优化处理方案.

关键词：双向电泳、等电聚焦、软骨

所属期刊栏目：31

分类号：R319(医用一般科学)

资助基金：南方医科大学南方医院院长基金2008C009;广东省医学科研基金资助项目A2010362

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：793-798