自分泌运动因子受体基因及其干扰RNA表达载体的构建

摘要：

目的 构建AMFR基因的表达载体和AMFR siRNA表达载体,观察AMFR siRNA对AMFR基因表达的影响.方法 采用PCR技术扩增AMFR基因,并将其插入到带FLAG标签的真核表达载体上;利用RNAi技术,设计并合成了两条针对AMFR基因的siRNA,将其克隆到pSliencer 2.1-U6 neo表达载体上.将构建的AMFR基因表达载体和AMFR siRNA表达载体共转染人胚肾细胞293T,通过Western blot实验了解AMFR siRNA对AMFR基因表达的影响.结果 通过双酶切和测序鉴定表明,构建的AMFR基因表达载体和AMFR siRNA表达载体序列正确;通过Western blot实验证明,构建的AMFR siRNA能有效抑制AMFR基因的表达.结论 成功构建了AMFR基因表达载体和AMFR siRNA表达载体,且表达的AMFR siRNA能有效地抑制AMFR基因的表达.

关键词：AMFR、表达载体、RNAi、转染

所属期刊栏目：30

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家重点基础研究发展规划9732004CB518907;国家自然科学基金30772562;国家高技术研究发展计划8632008AA02Z423

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：868-872