干扰hTERT降低人乳腺癌MCF-7细胞对γ射线引起的DNA损伤反应
目的 研究hTERT RNA干扰对人乳腺癌MCF-7细胞γ射线照射引起的DNA损伤反应的影响.方法 通过反转录病毒为载体的hTERT-siRNA,抑制人乳腺癌MCF-7细胞中端粒酶催化亚单位hTERT表达,实时定量RT-PCR及Western blot确认hTERT表达水平.用137Cs放射源以3 Gy剂量γ射线照射细胞,于照射前以及照射后1、2.4、8和12 h收集细胞,采用磷酸化53BP1抗体进行免疫荧光染色,并于照射前、照射后1、4和12 h收集细胞,Western blot检测53BP1蛋白磷酸化水平.结果 hTERT-siRNA处理的细胞hTERT表达水平比对照细胞降低3.20(2-△△Ct)倍,hTERT蛋白水平降低2.56倍.hTERT-siRNA处理的细胞对γ射线引起的DNA损伤反应显著降低.结论 RNA干扰hTERT表达水平,可以降低人乳腺癌MCF-7细胞对γ射线照射引起的DNA损伤反应.
端粒酶、γ射线、人乳腺癌MCF-7细胞、DNA损伤反应
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Q756(分子遗传学)
广东省科技计划2009B060700112
2013-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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