大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导肝星状细胞系凋亡
目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导大鼠肝星状细胞(HSCs)凋亡及其机制.方法 分离培养MSCs,HSC-T6系及纤维原细胞系冻融后传代使用.用6孔塑料培养板,建立上下双层细胞共培养体系.分3组:空白对照组、阴性对照组和实验组.以上体系培养观察24、48和72 h,于倒置相差显微镜下动态观察HSCs细胞形态;免疫组化法检测HSCs α-SMA表达;WST-8法检测HSCs增殖抑制率;流式细胞仪Annexin-V-FITC/PI双染法和DNA凝胶电泳(DNA Ladder)检测HSCs细胞凋亡;RT-PCR、Western blot检测HSCs caspase-3、BAX基因mRNA和蛋白表达.结果 实验组出现明显的DNA Ladder,24 ha HSCs增殖抑制率、凋亡率和caspase-3、BAX mRNA和蛋白表达呈时间依赖性显著高于对照组(P<0.01).结论 MSCs可在体外抑制HSCs增殖,可能通过旁分泌途径诱导HSCs凋亡,其凋亡发生是通过上调caspase-3、BAX表达发挥作用,本研究支持MSCs通过抑制HSCs产生而抗肝纤维化的机制.
骨髓间充质干细胞、肝星状细胞、凋亡、caspase-3、BAX
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R363(病理学)
广西自然科学基金0897008,0640133;广西"新世纪十百千人才工程"2006206;广西卫生厅青年基金2009102
2013-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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