小鼠胚胎干细胞来源的心肌细胞系的建立
目的 建立模拟细胞微环境、促进细胞分化的三维培养体系,以体外诱导和培养小鼠胚胎干细胞(mES-D3)来源的心肌细胞.方法 将mES细胞通过悬浮培养获得拟胚体(Ebs)后转入MatrigelTM Matrix 3D培养体系中培养.用形态学观察计数收缩集落的数量和频率;用免疫组织化学和RT-PCR检测心肌细胞分化相关基因的表达.结果 在MatrigelTM中培养5 d左右,可观察到自发节律收缩的Ebs,频率约为40~50次/min;继续培养3 d左右,频率约为80~90次/min;到45 d左右大部分集落最终收缩.分化为心肌细胞所表达的特异性蛋白cTnT、Desnfin和Actin表达呈阳性,并表达心肌特异性基因cTnT、NKX2E、GATA-4和MLC-2v.结论 mES细胞来源的Ebs在MatrigelTM培养体系中能够分化为心肌细胞,籍此我们建立了一株细胞系.
小鼠胚胎干细胞(mES)、拟胚体(EBs)、分化、心肌细胞
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R542.220.5(心脏、血管(循环系)疾病)
广东省自然科学基金7300931,7008952;广东省医学科研基金B2007158
2013-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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