PKCα siRNAs有效序列的筛选及其对肺癌A549细胞的作用

摘要：

目的 探讨人蛋白激酶Cα(PKCα)小干扰RNA(siRNA)对肺癌A549细胞生长增殖及凋亡的影响.方法 设计并化学合成6条PKCα siRNAs,转染A549细胞,通过改良MTY法及RT-PCR筛选;对3条效果较好的PKCαsiRNAs,进一步采用克隆形成抑制实验、Hoechst 33258染色、PI单染和Annexin V/PI双染以及Western blot检测.结果 6条PKCa siRNAs均显著下调了PKCα mRNA水平;除No.5 siRNA外,其他5条siRNA均显著地抑制了A549细胞增殖(P<0.05).3条效果较好的PKCα siRNAs转染组PKCα蛋白的表达显著下调,克隆形成抑制率、亚二倍体百分率和早期凋亡细胞比例均显著高于对照组(P<0.05),并出现了核固缩、边聚和裂解等凋亡形态学变化.结论 本实验发现3条能显著抑制A549细胞增殖并诱导其凋亡的PKCα siRNAs.

关键词：蛋白激酶Cα、RNA干扰、小干扰RNA、肺癌、A549

所属期刊栏目：29

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：暨南大学临床学院科研培育基金暨医临2005-05

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：611-617