MR1 siRNA抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖
目的 研究MR1基因对肝癌细胞增殖的影响及机制.方法 化学合成MRI siRNA,用脂质体lipofectamine2000转染肝癌细胞系BEL-7402细胞,RT-PCR检测MR1 siRNA基因沉默效果.用SRB法、集落形成法和生长曲线法检测MR1 siRNA对BEL-7402细胞增殖的影响.流式细胞术检测BEL-7402细胞周期,用细胞同步化的方法 ,即与G2期阻滞药物噻氨酯哒唑(nocodazole)联合应用,以间接反映MR1 siRNA对肿瘤细胞周期的影响.Western blot法检测Cyclin D1蛋白.结果 (1)300 nmol/L MR1 siRNA处理BEL-7402细胞24 hA,MR1基因的mRNA水平明显降低.(2)经siRNA处理后,BEL-7402细胞存活细胞数明显下降,细胞生长速度明显减慢,集落形成率显著下降,Cyclin D1表达水平明显降低.(3)MR1 siRNA与nocodazole联合处理BEL-7402细胞后,G2期细胞比例显著减少,而G1期细胞明显增多.结论 MR1基因与人肝癌BEL-7402细胞增殖相关,抑制MR1表达,能够引起细胞的增殖抑制,其作用机制与诱导细胞的G1期阻滞有关.
肌纤基因调节因子、siRNA、细胞周期、细胞增殖、BEL-7402细胞
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R394.2
国家自然科学基金30570771
2013-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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