脆性X智力低下蛋白的克隆表达与纯化

摘要：

目的 探讨脆性X智力低下蛋白(FMRP)的克隆表达与纯化条件.方法 用分子克隆的方法构建重组质粒pET22b(+)-FMR1,并将其转入原核表达菌株E.coli BL21(DE3)中诱导表达;用固化Ni2+吸收色谱纯化重组FMRP,Western-blot鉴定并将纯化得到的蛋白与已知的RNA片段进行结合反应.结果 成功构建了重组表达质粒pET22b(+)-FMR1,在E.coli BL21(DE)中表达出相对分子质量约79 000的蛋白;该蛋白为FMRP,且可与特定RNA相互作用.结论 在原核系统中表达得到了纯度和活性都较为理想的FMRP蛋白,为相关功能性研究奠定了基础.

关键词：脆性X智力低下蛋白(FMRP)、pET22b(+)、BL21(DE3)、RNA结合

所属期刊栏目：28

分类号：R394;Q786

资助基金：国家自然科学基金2004CB518601

在线出版日期：2008-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：692-695