建立稳定抑制死亡相关蛋白激酶表达的细胞系

摘要：

目的 筛选稳定抑制DAPK表达的PC12细胞系,并观察这些细胞系的生长特性.方法 设计、合成4条RNA干扰序列,连接到pDsRed1-N1-U6质粒载体上,扩增后提取质粒转染到PC12细胞,并同时转染1株空载质粒作为对照,然后通过G418筛选细胞克隆,建立稳定增殖细胞系,再通过Western blot筛选最为有效的干扰序列,最后用MTT、流式细胞术等检测转染细胞系的生长特性.结果 4条干扰序列均已成功转染并筛选出单克隆细胞系,Westem blot实验结果证实,4条干扰序列中有3条对DAPK的表达有明显的抑制作用,其中以第2条干扰序列的抑制效果最为明显.结论 成功建立稳定增殖和抑制DAPK表达的细胞系.

关键词：死亡相关蛋白激酶、干扰技术、表达载体法、PC12细胞

所属期刊栏目：28

分类号：Q291;Q782;Q784

资助基金：广东省卫生厅科研项目WJ0602

在线出版日期：2008-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：222-226