P19细胞心肌体外分化诱导条件的优化

摘要：

目的 分别观察P19细胞心肌分化诱导中的几种影响因素,优化P19细胞心肌分化的诱导条件.方法 使用悬滴法或96孔板悬浮培养法制备细胞聚集体(aggregates),二甲基亚砜(DMSO)为诱导剂诱导P19细胞的心肌分化.普通光学显微镜下观察跳动的心肌细胞的产生来确定诱导是否成功,免疫荧光染色确认心肌特异性蛋白Tro-ponin T的表达,RT-PCR方法检测分化诱导后心肌细胞标志基因的表达情况.结果 使用96孔板悬浮培养法诱导细胞形成聚集体后转入贴壁培养阶段时细胞聚集体贴壁状态优于传统的悬滴法.DMSO的加入可以提高细胞形成聚集体后贴壁时细胞聚集体的完整性.1×10(7)～2×10(8)L-1的接种浓度下心肌细胞分化诱导效率较高.在可观察到跳动的心肌细胞之前即可检测到Troponin T的表达.结论 通过对细胞形成聚集体的诱导方法、诱导剂、接种浓度等因素的优化可以提高P19细胞的心肌分化效率,为开发高效心肌分化诱导法提供了条件.

关键词：P19细胞、心肌细胞、分化

所属期刊栏目：28

分类号：Q254(细胞生理学)

在线出版日期：2008-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：177-180