人乳腺癌MDR1基因稳定沉默细胞的筛选及其生物学特性

摘要：

目的 筛选MDRl沉默的人乳腺癌细胞并比较其生物学特性.方法 采用BLOCK-iT Lentiviral RNAi Expression System生产表达MDRl基因shRNA的慢病毒载体,转导敏感人乳腺癌细胞MCF-7和耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADM,杀稻瘟菌素(blasticidin)筛选获得MDRl稳定沉默细胞MCF-7/RNAi和McF-7/ADM/RNAi.定量RT-PCR检测MDRl mRNA表达,流式细胞术检测P-GP蛋白表达和功能,MTT法检测药物敏感性.结果 经10 mg/L blasticidin筛选12 获得MCF-7/RNAi和MCF-7/ADM/RNAi细胞.MCF-7、MCF-7/RNAi、MCF-7/ADM和MCF-7/ADM/RNAi细胞的MDRl mRNA相对表达水平分别为1、0.13、17.14和2.01;P-GP表达分别为(1.5±0.3)%、(1.24±0.2)%、(89.4±3.6)%和(16.3±1.9)%;细胞内Rh123的潴留分别为(92.4±3.1)%、(90.6±4.0)%、(13.6±1.6)%、(72.4±2.8)%;IC50值分别为0.90、0.92、19.61和4.04 mg/L.结论 应用慢病毒载体稳定沉默MDR1基因可有效逆转人乳腺癌细胞耐药性.

关键词：乳腺癌、多药耐药基因1、RNA干扰、慢病毒

所属期刊栏目：28

分类号：R737.9;R730.54(肿瘤学)

资助基金：山东省卫生厅资助项目2003-138

在线出版日期：2008-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：138-143