GRIM-19基因的克隆及其对小鼠前列腺癌细胞株的促凋亡作用

摘要：

目的 构建GRIM-19基因真核表达质粒,探讨GRIM-19基因转染对小鼠前列腺癌rm-1细胞的促凋亡作用.方法 采用RT-PCR及重组DNA技术构建pcDNA-GRIM-19真核表达质粒,体外进行基因转染.形态学观察,DNA ladder检测转染后rm-1细胞凋亡,RT-PCR方法检测rm-1细胞caspase-3活性.结果 扩增出GRIM-19 cDNA全长,测序结果与GenBank记载基本一致.转染rm-1细胞48 h后证明其能在真核细胞表达,形态学及共聚焦显微镜观察到pcDNA3.1-GRIM-19重组质粒组出现明显的细胞凋亡,并出现典型的DNA ladder.转染pcDNA3.1-GRIM-19重组质粒组caspase-3表达强度较对照组及空质粒组明显上调(P＜0.05).结论 成功克隆并构建鼠GRIM-19基因真核表达载体pcDNA3.1-GRIM-19,该载体可诱导鼠rm-1细胞凋亡.其凋亡机制与caspase-3酶活性有关.

关键词：GRIM-19基因、克隆、真核表达载体、转染、凋亡

所属期刊栏目：28

分类号：R737.25(肿瘤学)

资助基金：科技部国际科技合作项目2004DFB02000;中国-日本合作项目第59号

在线出版日期：2008-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：13-17