兔外周血内皮祖细胞培养及HTK基因体外修饰

摘要：

目的 探讨兔外周血来源的内皮祖细胞(EPCs)经体外基因修饰后能否成功表达目的 基因.方法 分离兔外周血单个核细胞进行定向培养,观察细胞摄取DiI-Ac-LDL的能力,免疫荧光法检测EPCs的细胞表面标记.同时PCR扩增人组织激肽释放酶(HTK)基因,构建以GFP为报告基因的重组真核表达载体,转染体外培养的EPCs后,荧光显微镜下观察HTK-EGFP融合蛋白的表达,通过RT-PCR与ELISA方法检测HTK的表达水平.结果 细胞培养5～6 d开始出现成簇的短梭形贴壁细胞,15 d后形成鹅卵石样细胞层,传代后的细胞能摄取DiI-Ac-LDL,免疫荧光显示vWF和CD133+;pEGFP-HTK重组质粒在EPCs中可以稳定表达,表达的融合蛋白具有HTK和EGFP的双重活性.结论 HTK基因修饰兔外周血EPCs对于血管病的治疗可能具有良好的前景.

关键词：激肽释放酶、内皮祖细胞、动脉损伤、血管病

所属期刊栏目：27

分类号：Q954.56(动物学)

资助基金：山东省科技厅优秀中青年科学家基金9915

在线出版日期：2008-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1241-1245