人rBPI23在大肠杆菌DH5α中的表达及其多克隆抗体的制备

摘要：

目的 制备人rBPI23蛋白并免疫家兔获得特异性多克隆抗体.方法 将本室制备的pBV220-synBPI600表达载体转化感受态E.coli DH5α,温控诱导后,获得以包涵体形式表达的目的 重组蛋白;用SDS-PAGE鉴定分子质量,West-ern blot鉴定抗原性;免疫家兔获得抗rBPI23抗血清,经饱和硫酸铵沉淀获得多克隆抗体,间接法ELISA检测抗体效价,Western blot分析抗体的特异性.结果 重组蛋白主要以包涵体形式表达,SDS-PAGE显示其分子质量约23 ku,与预期结果相符;重组蛋白能与市售兔抗人BPI抗体特异性结合;免疫家兔获得高效价(1∶320000)抗血清,上述抗体能与rBPI23及人BPI标准品特异性结合.结论 成功制备了人rBPI23,免疫家兔获得高效价抗人rBPI23多克隆抗体,为制备单克隆抗体及后期建立BPI免疫学检测方法奠定基础.

关键词：rBPI23、原核表达、多克隆抗体制备

所属期刊栏目：27

分类号：R392

资助基金：北京市教委科技发展计划KZ200410025010

在线出版日期：2008-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1219-1222