α-Synuclein磷酸化修饰提高MN9D细胞内TH的活性

摘要：

目的 观察突触核蛋白(α-Synuclein,α-SYN)第129位丝氨酸(Ser129)磷酸化修饰对酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)活性的影响.方法 应用重叠延伸PCR定点突变法将129位丝氨酸编码碱基TCT突变为天冬氨酸(Asp,D)编码碱基GAT,获得编码模拟磷酸化α-Syn(S129D α-SYN)的DNA序列,插入逆转录病毒真核表达载体(pLNCX2).包装逆转录病毒颗粒并感染多巴胺能神经细胞MN9D.通过实时定量RT-PCR鉴定α-SYN基因表达,Western blot检测TH磷酸化水平.结果 pLNCX2-α-SYN(wild type/S129D)质粒测序结果正确,并在MN9D细胞中均过表达.野生型α-SYN过表达组同正常对照组相比TH磷酸化水平降低(P＜0.01),而S129D α-SYN组TH的磷酸化水平同正常对照组相比明显升高(P＜0.05).结论 在MN9D细胞中,野生型α-SYN抑制TH的活性,而α-SYN Ser129磷酸化后TH活性明显升高.

关键词：突触核蛋白、磷酸化、酪氨酸羟化酶、重叠延伸PCR

所属期刊栏目：27

分类号：R742.5(神经病学与精神病学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2006CB500706;国家自然科学基金30430280;北京市教委科技发展计划KM200610025002

在线出版日期：2007-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：601-604