10.3969/j.issn.1001-6325.2006.12.008
MAPK和NF-κB上调脂多糖诱导的小鼠肺微血管内皮细胞Toll-like受体4的表达
目的 观察MAPK和NF-κB在经脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)Toll-like受体4(TLR4)表达增强中的作用.方法 分离培养PMVECs.不同浓度的LPS与PMVECs共培养2 h,或与LPS(100 μg/L)作用不同时间.用ELISA法检测培养上清液中TNF-α含量.分别用ERK抑制剂PD98059和P38MAPK抑制剂SB203580或NF-κB抑制剂PDTC进行干预.用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR4和TNF-αmRNA.用Western-blot检测ERK/P38 MAPK和核蛋白NF-κB的表达.结果 在LPS浓度为50~500μg/L时,作用于PMVECs 2 h,或LPS 100 μg/L作用不同时间时,培养上清液中TNF-α含量呈剂量和时间依赖性显著增加(P<0.01).PMVECs表达TNF-α及TLR4 mRNA增加,6 h时达高峰.分别用上述抑制剂均可缓解上述变化,而同时联合使用PD98059和SB203580则进一步增强该抑制作用.上述抑制剂分别缓解LPS诱导的PMVECs表达ERK/P38 MAPK和NF-κB蛋白增强.结论 MAPK和NF-κB上调给脂多糖诱导的小鼠PMVECs TLR4的表达.
急性肺损伤、脂多糖、核因子-κB、丝裂素活化蛋白激酶
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R3(基础医学)
国家重点基础研究发展计划973计划G2000057004
2007-01-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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