TRKC基因体外转染大鼠神经干细胞的方法

摘要：

目的 探讨体外转染TRKC基因的神经干细胞的制备方法.方法 利用自行合成的引物进行PCR反应,定向克隆构建TRKC-cDNA质粒并进行DNA测序分析,将pEGFP-C1质粒和TRKC-cDNA质粒进行酶切、重组,构建出pEGFP-C1-TRKC质粒.用脂质体将重组质粒转染到体外培养的大鼠神经干细胞中.用Western blot、免疫荧光和MTr法观察转染基因的表达和转基因后神经干细胞的增殖活性.结果 成功构建了TRKC-cDNA质粒,DNA测序证明所获得的目的基因与公布序列的一致性为99%,所获得的重组子符合研究要求.pEGFP-C1-TRKC质粒转染到神经干细胞后,宿主细胞能高效、稳定地表达目的基因产物GFP和TRKC.在NT-3作用下转TRKC基因神经干细胞的增殖活性有明显增强.结论 以质粒为载体、脂质体为介导可成功地把TRKC基因转染到神经干细胞内,转染基因表达好且具有功能.

关键词：神经营养素-3、酪氨酸激酶C、神经干细胞、基因转染

所属期刊栏目：26

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30400466

在线出版日期：2006-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1239-1243