抗重组人组织因子途径抑制物1单抗抑制rhTFPI-1的抗凝作用

摘要：

目的 研制抗重组人组织因子途径抑制物1单克隆抗体(rhTFPI-1 McAb),了解其对rhTFPI-1抗凝活性的抑制作用.方法将分泌rhTFPI-1 McAb的杂交瘤细胞注入经降植烷预处理的Balb/C小鼠腹腔中,诱生腹水.腹水先经硫酸铵沉淀处理,再用rprotein A亲和层析柱进一步纯化.对纯化后的单克隆抗体进行SDS-PAGE检测和Western blot分析.并用发色底物法测定rhTFPI-1 McAb对rhTFPI-1的活性抑制.结果 纯化后的抗rhTFPI-1 McAb经SDS-PAGE检测,其纯度为98%;Western blot分析显示其能特异识别rhTFPI-1抗原.发色底物法检测结果表明,其能有效阻断rhTFPI-1的抗FVIIa/TF活性,McAb浓度为8 mg/L时FVIIa/TF剩余活性达到86%;但对rhTFPI-1的抗FXa活性作用不明显,McAb浓度为80 mg/L时FXa的剩余活性为48.4%.结论 rhTFPI-1 McAb可明显抑制rhTFPI-1活性,阻碍rhTFPI-1对TF/FVIIa的抑制活性.纯化后的rhTFPI-1 McAb的各项鉴定指标均较为理想,rprotein A亲和层析柱纯化方法简便易行值得推广.

关键词：单克隆抗体、组织因子途径抑制物、rprotein A 亲和层析法

所属期刊栏目：26

分类号：R9(药学)

资助基金：国家科技攻关计划2004BA720A06-02;上海市科技攻关项目04DZ19104;上海市"曙光计划"02SG05

在线出版日期：2006-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1186-1190