siRNA抑制HPV18 E6基因及其对HeLa细胞凋亡的影响

摘要：

目的 研究特异小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对宫颈癌HeLa细胞中人乳头瘤病毒(human pap-illomavirus,HPV)18型E6基因的抑制及其对细胞凋亡的影响.方法 针对 HPV18 E6基因设计siRNA序列,经PCR方法体外扩增,得到含有U6启动子以及siRNA序列的PCR产物,利用 Lipofectamine TM2000脂质体转染HeLa细胞,在U6启动子的作用下于细胞内转录siRNA.针对转染后不同时间点采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活力,流式细胞仪PI染色法检测细胞凋亡率,RT-PCR测定HPV18 E6 mRNA变化.结果 转染siRNA后细胞活力受到显著抑制(P＜0.05),光镜下出现明显的凋亡形态,72 h的凋亡率达到55.8%.RT-PCR结果显示,细胞转染24、48和72 h后HPV18 E6 mRNA分别减少了57%、78%和40%,而siRNA阴性对照与未转染细胞相比差异不显著.结论 siRNA可特异有效的干扰宫颈癌HeLa细胞内HPV18 E6基因的表达,从而可诱导肿瘤细胞凋亡.

关键词：siRNA、HeLa细胞、HPV18 E6基因、凋亡

所属期刊栏目：26

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：广东省广州市科技攻关项目01-Z-005-01

在线出版日期：2006-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1112-1117