pcDNA3.1(+)TPA构建及其在人皮肤成纤维细胞的表达活性

摘要：

为建立TPA基因治疗缺血性心脏疾病及防止血管再狭窄的新方法.构建真核表达载体pcDNA3.1(+)TPA,并采用脂质体法将其转入体外培养的人皮肤成纤维细胞,并观察外源性TPA表达情况.结果发现:真核表达载体pcDNA3.1(+)TPA在人皮肤成纤维细胞中获有效表达,酶联免疫吸附法TPA蛋白表达定量检测结果为647.8 ng/(106细胞·24 h),未转pcDNA3.1(+)TPA的人皮肤成纤维细胞测得为19.2 ng/(106细胞·24 h);发色底物法测得外源性TPA活性为125.0 U/(106细胞·24 h),未转pcDNA3.1(+)TPA的人皮肤成纤维细胞测得为5.8 U/(106细胞·24 h).提示:pcDNA3.1(+)TPA转入人皮肤成纤维细胞后,外源性TPA基因获有效表达,为TPA基因治疗缺血性心脏病的临床研究提供了前提基础.

关键词：组织型纤溶酶原激活因子、基因治疗、pcDNA3.1、皮肤成纤维细胞、缺血性心脏病

所属期刊栏目：25

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国科学院资助项目30200280;浙江省湖州市自然科学基金01JJY2077;高等学校博士学科点专项科研项目20020533026

在线出版日期：2005-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：20-24