10.3969/j.issn.1001-6325.2004.03.021
二型谷氨酸羧肽酶稳定表达细胞株的建立
为了深入研究二型谷氨酸羧肽酶(glutamate carboxypeptidase Ⅱ,GCP Ⅱ)功能和了解其在兴奋性氨基酸代谢过程中作用,拟构建GCP Ⅱ的表达载体,建立稳定表达细胞株; 采用聚合酶链反应,酶切连接,和蓝白筛选的方法,构建表达载体;磷酸钙共沉淀的方法转染HEK293细胞,G418筛选阳性细胞克隆;逆转录聚合酶链反应和免疫荧光细胞染色的方法鉴定阳性细胞株.采用PCR方法扩增出GCP Ⅱ;构建含有GCP Ⅱ基因的表达载体--pcDNA3.1-NA;建立了细胞株 HEK 293-NA.成功构建了GCP Ⅱ的表达载体,建立了稳定表达细胞株,为深入研究该酶的功能和兴奋性氨基酸毒性作用奠定了基础.
二型谷氨酸羧肽酶、表达载体、稳定表达细胞株
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R329.2+4(人体形态学)
2004-08-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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