小鼠蛋白激酶CK2β亚基的克隆、表达及活性测定

摘要：

通过反转录PCR从NIH 3T3小鼠成纤维细胞中获得小鼠蛋白激酶CK2β亚基编码区cDNA;构建其表达质粒并经测序证明其编码小鼠蛋白激酶CK2β亚基,但与两种已报道的小鼠CK2β亚基cDNA编码区序列分别存在一个碱基差异,与大鼠、猪、兔和人CK2β亚基cDNA的编码区相应碱基序列则一致.将其在表达菌BL21(DE3)中诱导表达,出现一26kDa分子量蛋白过度表达,表达蛋白占菌体总蛋白的31.7%,但大多数以不溶形式存在.Western blot鉴定表明:过度表达产物能与抗人CK2β亚基抗体发生特异性免疫反应.当CK2 α和β亚基以1:1摩尔比混合时,构成性的CK2全酶显示出最大活性,直接表明CK2β亚基对CK2α有激活作用.这些结果有力地证明了克隆表达的重组蛋白是小鼠蛋白激酶CK2β亚基.

关键词：β调节亚基/蛋白激酶CK2/小鼠、分子克隆、DNA测序、表达、免疫印迹

所属期刊栏目：23

分类号：Q555+.7;Q78(酶)

资助基金：广东省自然科学基金011766;广东省科技厅科技计划2002C30109;广东省湛江市科技局科研项目ZK0006;广东医学院校科研和教改项目XK0002

在线出版日期：2004-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：392-398