基因工程乳腺癌特异性人单链抗体的表达与特性

摘要：

研究解决分泌人单抗的杂交瘤细胞系难于稳定持久分泌抗体的难题,制备单链抗体,使单抗分子小型化,为进一步研究其在肿瘤诊断和治疗中的应用作准备.从分泌抗乳腺癌人单抗的杂交瘤细胞CM-1总RNA中,利用RT-PCR技术分别扩增出人单抗重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,将扩增产物纯化后克隆于pGEM-T载体中,进行DNA测序和序列比较分析后,将两者共克隆于表达载体中诱导表达,利用斑点免疫印迹及竞争抑制法检测表达产物的抗原性. 所克隆的CM-1人单抗重链可变区和轻链可变区基因片段,分别属于人免疫球蛋白IgM Ⅲ亚群,和鼠κ轻链V亚群,ⅩⅦ家族,用斑点免疫印迹法检测可见表达产物能与人乳腺癌细胞特异结合;人CM-1单克隆抗体对此单链抗体与人乳腺癌细胞的结合有竞争性抑制作用,抑制率为75.7%.结论成功地制备了可特异结合乳腺癌细胞的CM-1单链抗体.

关键词：乳腺癌、人单克隆抗体CM-1、单链抗体

所属期刊栏目：22

分类号：R737.9;Q789(肿瘤学)

资助基金：卫生部科研项目961067

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：324-327，329