血管紧张素转换酶固相化方法的选择

摘要：

分别采用琼脂包埋法、卵清包埋法、海藻酸钙包埋法、明胶-戊二醛包埋法、溴化氰活化连接法和苯甲磺酰氯结合方法对血管紧张素转换酶进行固相化研究,发现苯甲磺酰氯结合法用于血管紧张素转换酶固相化效果最好.此实验是在低水活度条件下,利用苯甲磺酰氯在丙酮和吡啶存在的条件下活化Sepharose CL-4B凝胶侧链基团上的羟基,形成具有高反应活性的苯甲磺酰基团,在pH7.8的0.2mol/L HEPES-HCl缓冲系统中,4℃反应12h,将酶与凝胶连接在一起.25mg ACE与5g活化琼脂糖凝胶在这种条件下反应,所得固相酶活力为10.86U/mg,蛋白固相率达到66%,酶活力固相率为53.3%.固相酶4℃保存3个月,活力剩余80%,20℃保存1个月酶活残留61%.同样条件下,溶液酶活力分别只剩余62%和19%,由此可见血管紧张素转换酶经固相化后稳定性明显提高.

关键词：血管紧张素转换酶、Sepharose CL-4B、苯甲磺酰氯、固相化

所属期刊栏目：21

分类号：Q556.3(酶)

资助基金：国家新药研究项目96-901-05-85

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：278-281