人生长激素的生物素-亲和素放大酶联免疫法的建立

摘要：

为建立有生物素和亲和素放大系统的人血清生长激素(hGH)酶联免疫分析法(BA-ELISA),以微量的GH抗原免疫BALB/C小鼠,利用杂交瘤技术制备出29株分泌抗hGH单克隆抗体(MCA)的杂交瘤株.选择最佳配对MCA,利用亲和素与生物素高亲和力的特性,建立了血清hGH双位点的BA-ELISA法.我们的MCA滴度为(0.5 ～ 50.0)×104,亲和常数Ka=(0.13～1.40)×1010L/mol.血清hGH的ELISA的灵敏度为0.04±0.01 μg/L;在血清中分别加入1,2.5,5μg/L的hGH,其回收率为 90.7%～107.6%(平均为 101.20% ±0.03 %);hGH含量为2.8、10.0、29.8μg/L 的血清批内、批间变异系数分别为4.9%、3.8%、7.9%和6.2%、3.5%、9.5%;用本法测定了正常儿童、生长激素缺乏症(GHD)患儿和活动性肢端肥大症患者空腹血清hGH水平,分别为1.87±3.0、0.30±0.42和8.71±6.95 μg/L.上述结果表明,本ELISA方法灵敏、特异、稳定、准确,能确切反映hGH分泌功能,在诸多方面均优于RIA.

关键词：人生长激素、单克隆抗体、生物素、亲和素、酶联免疫吸附分析法

所属期刊栏目：21

分类号：Q575.+11;R446.61(激素)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：275-277