10.3969/j.issn.1001-6325.2001.02.022
脂质体介导质粒转染角朊细胞的影响因素
探讨利用脂质体介导真核表达质粒转染体外培养的人角朊细胞的最佳转染条件。体外分离培养正常人角朊细胞,培养至60%、70%、80%、90%及100%融合时,应用不同浓度的LipofectAMINE包被真核表达质粒pCMV*SPORT-β-gal,分别转染6、8、10、12及24h。细胞经转染后再培养48h,行β-半乳糖苷酶原位染色,镜下观察并计算阳性转染率。被转染的阳性细胞,可见质粒β-半乳糖苷酶基因的良好表达;当细胞融合率为80%、90%,以12.5μL/100μL的LipofectAMINE包被1.5μg/100μL的pCMV*SPORT-β-gal,转染时间为8 h的转染率最高,可分别达到(31.35±1.35)%、(32.32±2.4)%。该实验说明LipofectAMINE可有效地介导真核表达质粒转染培养的人角朊细胞;转染率与细胞生长状态、脂质体包被质粒的浓度比例、及转染时间直接相关。
基因转染、脂质体、角朊细胞、细胞培养
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Q782.2(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金39600153
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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