10.3969/j.issn.1001-6325.2001.01.005
硫氧还原蛋白突变基因用于鲑鱼降钙素的高效可溶性融合表达
为了化学裂解后重组多肽的分离纯化,用双引物定点突变的方法将表达质粒pTrx-sCT-Gly中硫氧还原蛋白(Trx)与鲑鱼降钙素(sCT)的融合基因的第38位Met突变为Ala,并将突变后的基因克隆到pET30a中,然后转入大肠杆菌BL21,以IPTG诱导,使降钙素与硫氧还原蛋白融合表达,融合蛋白占菌体总蛋白的56%左右。并发现本原核表达体系存在“表达渗漏”现象,此现象为在菌体的对数生长期中,外源蛋白极少表达,随着培养时间的延长,外源蛋白逐步积累,达到51%的高水平。该发现在基因工程生产重组蛋白工艺中具有应用价值。
鲑鱼降钙素、定点突变、高效表达、表达渗漏
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R394.112
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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