HBV感染患者外周血单个核细胞HBV DNA和cccDNA的检测

摘要：

目的 探讨乙型肝炎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)能否感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)并进行复制.方法 选取137例住院患者作为研究对象,采集血液标本,分离提取外周血单个核细胞,使用细胞甩片法固定细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术(real-time quantitative pol-ymerase chain reaction,QPCR)和滚环扩增结合原位跨缺口原位聚合酶链式反应技术检测HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA);免疫组织化学染色法检测HBV DNA和HBV cccDNA表达.结果 137例标本中,68.6％ (94/137)的标本经免疫组化染色后检测出HBV DNA的表达;83.9％ (115/137)的标本原位杂交和滚环扩增PCR后检出HBV cccDNA阳性信号;血清HBV DNA浓度高于106 copies/ml的患者PBMC中HBV cccD-NA阳性率为95.1％,低于106 copies/ml的阳性率为51.4％.结论 高浓度外周血HBV DNA是HBV感染外周血单个核细胞的危险因素,通过原位聚合酶链式反应方法能够更灵敏地检测HBV DNA和cccDNA在PBMC中的表达,为进一步研究证实PBMC感染导致HBV母婴传播途径的分子机制奠定基础.

关键词：肝炎病毒、乙型、DNA、原位标记

所属期刊栏目：20

分类号：R373.21;R181.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：北京市自然科学基金7122126

在线出版日期：2016-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：888-892