MDCK、HEp-2、Vero细胞混合冻存适用于分离培养常见病毒研究

摘要：

目的 建立犬肾细胞(MDCK)、人喉表皮癌细胞(HEp-2)和非洲绿猴肾细胞(Vero)3种细胞(MHV)混合细胞瓶冻存复苏方法,经冻存复苏的混合细胞用于分离常见呼吸道和肠道病毒,建立病毒性病原检测的方法学平台.方法 对数生长期的MDCK、HEp-2和Vero细胞等量保存在含8％二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)冷冻保存液中,液氮经冻存4个月后复苏并进行细胞计数；在复苏后0h、24h和48 h倒置显微镜下观察细胞形态、细胞汇合；并用于分离培养常见呼吸道、肠道病毒,观察致细胞病变效应,采用直接与间接免疫荧光法鉴定.结果 在液氮中保存4个月的MHV混合细胞,细胞复苏存活率超过99.20％,镜下细胞折光度好,细胞形态良好,均见到相应的致细胞病变效应和免疫荧光检测阳性结果.结论 MDCK、HEp-2和Vero细胞等量保存在含8％ DMSO冷冻保存液中液氮保存4个月复苏存活率高.混合细胞直接冻存复苏方法建立,为常见的病毒性病原分离培养提供了宽泛的合适细胞宿主,保证了病毒性传染病的快速诊断、实验室病毒性传染病监测的可操作性.

关键词：上皮样细胞、肠道病毒感染、传染病

所属期刊栏目：16

分类号：R512.5(传染病)

资助基金："十一五"国家科技重大专项2009ZX10004-104;上海市科委资助项目09DZ1906605

在线出版日期：2013-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：827-832