猪囊尾蚴抗原基因6H的克隆、表达及鉴定

摘要：

目的 为寻找猪囊尾蚴病新的免疫学候选诊断分子奠定基础.方法 设计合成引物,用PCR法从cDNA文库中扩增出猪囊尾蚴抗原6H基因编码序列,将其克隆入PMD-18T载体,然后在原核表达载体PET-28a中亚克隆,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot观察表达结果.结果 用PCR法扩增出一条大小约774bp的特异性片段,克隆质粒PMD-18T-6H和原核表达质粒PET-28a-6H作BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切和以重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段.诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约33kDa大小的融合蛋白条带,Western blot结果显示其可与猪囊尾蚴病人血清起反应.结论 本实验成功地克隆了猪囊尾蚴抗原6H编码基因,并在原核细胞中进行了表达及鉴定,为进一步免疫诊断研究奠定了基础.

关键词：寄生虫病、抗原、基因克隆

所属期刊栏目：13

分类号：R349.6;R53(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：安徽省高等学校青年科研资助项目2002jq136

在线出版日期：2009-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：317-319