体外转录法制备地高辛标记HCV核心区RNA探针及其初步应用

摘要：

目的 制备地高辛标记的HCV核心区 RNA探针,用于筛选与丙型肝炎病毒(HCV)RNA核心区结合的细胞蛋白质分子.方法 采用RT-PCR方法,从HCV感染者血清中扩增HCV C区cDNA序列,将所得序列克隆入载体PinpointTM-T Vector和pGEM-7EF(+)Vector,进行PCR、酶切和测序鉴定.以HCV-pGEM-7EF(+)中的HCV核心区cDNA序列作为体外转录RNA的模板,经T7 RNA聚合酶转录得到地高辛标记的HCV核心区RNA探针.将地高辛标记的探针用于紫外交联实验,筛选HepG2细胞中可与HCV RNA结合的蛋白质分子.结果 所得HCV核心区cDNA序列为503 bp.地高辛标记的HCV核心区探针初步筛选到两个与HCV RNA结合的蛋白.结论 地高辛标记的HCV核心区RNA探针具有较高的特异性和敏感性,可用于筛选与HCV RNA结合的细胞蛋白质分子.

关键词：肝炎病毒、丙型

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分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划39970652

在线出版日期：2006-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：324-327