10.3969/j.issn.1674-3679.2005.02.017
用TaqMan探针实时定量PCR法快速检测鼠疫耶尔森菌
目的建立一种快速、准确、特异的定量检测鼠疫耶尔森菌的方法.方法针对鼠疫耶尔森菌特异的染色体标识序列设计引物和TaqMan探针,进行实时定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)分析,优化反应体系,检测其灵敏度、特异性和重复性.结果以EV76灭活培养物为对象,检测灵敏度可达每反应体系0.08 CfU;30株非鼠疫菌株的检测结果表明,对照菌株均为阴性,检测特异性良好;对同一样品进行17次重复检测,其循环阈值的标准偏差为0.35.结论 TaqMan探针法能够灵敏、特异、稳定地对鼠疫耶尔森氏菌进行定量检测,为鼠疫监控、诊断提供有力手段.
DNA引物、聚合酶链反应、耶尔森氏菌、鼠疫、DNA探针
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R378.61;R394.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家高技术研究发展计划863计划2002AA215011
2005-05-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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