藻蓝蛋白裂合酶CpcS1与CpcT1的复合物初步研究

摘要：

研究证实裂合酶CpcSl、CpcTl能分别催化藻蓝蛋白β亚基(简称CpcB)的两个色素结合位点(84位和155位)共价偶联藻蓝色素PCB(phycocyanobilin),但通过实验发现仅CpcSl和CpcTl共同催化CpcB无法生成天然构像的色素蛋白.为了挑选出辅助裂合酶,经过综合分析,筛选出6个与CpcSl、CpcTl同源的裂合酶.将编码裂合酶的基因按照本实验的需求,重新构建在其它载体上,在大肠杆菌BL21体内表达出蛋白后,分别与CpcSl、CpcTl混合·利用亲和层析分离,然后通过蛋白质电泳图谱初步分析裂合酶之间形成复合物的情况.能形成复合物的裂合酶,再与CpcSl、CpcTl及脱辅基蛋白共同转入大肠杆菌BL21体内进行体内重组研究.结果表明,CpcTl能分别与CpcSl、CpcT2、PecF形成复合物,但这些复合物均不能辅助催化CpcB生成天然产物.

关键词：藻蓝蛋白β亚基、裂合酶CpcSl和CpcTl、复合物、亲和层析

所属期刊栏目：43

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金项目30870541,30870519;教育部高等学校博士学科点专项科研基金项目20060487018

在线出版日期：2009-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：474-480