沙门菌噬菌体T139基因组分析及其裂解酶LysT40的异源表达和活性鉴定
为开发噬菌体裂解酶作为一种新型的抗菌剂,用于沙门菌的防控,采用生物信息学及异源表达蛋白的方法,获得鼠伤寒沙门菌噬菌体T139的裂解酶,并验证裂解酶对鼠伤寒沙门菌的裂解活性.通过对鼠伤寒沙门菌噬菌体T139基因组进行分析,发现该基因组全长38854 bp,平均GC含量为49.10％,不包含tRNA基因.进化树分析表明噬菌体T139属于T7噬菌体属,共预测出43个ORFs,有23个被赋予已知功能.多序列比对及保守结构域分析表明,orf 40基因编码的蛋白(LysT40)包含126个氨基酸残基,具有内肽酶保守结构域,为可能的噬菌体裂解酶.LysT40二级结构中存在大量的螺旋结构(70.63％),使得该蛋白能够保持结构稳定.将orf 40进行异源表达、纯化,经过SDS-PAGE和Western blot分析,在10～15 ku处获得单一目标蛋白条带,纯化的蛋白质量浓度为280μg/mL.LysT40在30 min内对氯仿或EDTA预处理的鼠伤寒沙门菌具有较好的裂解活性,吸光值OD600相比于对照组分别下降0.18和0.31.
鼠伤寒沙门菌;基因组分析;噬菌体裂解酶;表达纯化;裂解活性;食源性致病菌;抗菌药物替代品
40
TS201.3;R117(食品工业)
"十三五"国家重点研发计划重点专项;国家自然科学基金面上项目
2021-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
176-185
