苜蓿中华根瘤菌共生固氮相关基因突变体的分离和鉴定

摘要：

为了阐明豆科植物共生反应与免疫反应的协调机制,揭示参与植物细胞侵染、定殖及固氮过程中根瘤菌基因的功能,以苜蓿中华根瘤菌Sm2011为材料,构建了约8 000株Tn 5-sacB转座子插入的突变体库.利用巢式PCR检测技术,从中鉴定和筛选出nodC、nifH、smc01188和smc04024等4个特定目标基因的插入突变体及其插入位点.通过结瘤试验考察突变体共生及固氮表型,结果显示:植株接种smc01188突变体28 d后,与对照植株相比,该基因突变导致根瘤固氮酶活下降,与慢生型大豆根瘤菌该基因突变体的表型类似;smc04024基因突变不影响植株生长,根瘤发育基本正常;接种ni fH突变体后,植株呈缺氮表型,生长发育受阻,根瘤为白色;接种nodC突变体后植株不结瘤,说明Tn5-SacB的插入导致nifH、nodC基因功能丧失.利用PCR检测、鉴定和分离目标基因突变体是一种行之有效的方法.

关键词：苜蓿中华根瘤菌、共生固氮、Tn5转座子、插入突变体

所属期刊栏目：38

分类号：Q939.9(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金项目31670240

在线出版日期：2019-03-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：43-49