稀有放线菌小单孢菌与大肠杆菌接合转移体系的构建
为将外源基因导入小单孢菌,建立小单孢菌(Micromonospora)与大肠杆菌两亲接合转移方法,将包含小单孢菌内源质粒pJTU112复制区的4.7 kb片段插入质粒pOJ260的Bam HI酶切位点,构建了能在大肠杆菌和小单孢菌中复制的穿梭载体pSCU207,将质粒pSCU207转化大肠杆菌ET12567/pUZ8002,再与小单孢菌LXH20进行两亲接合转移,挑取接合转移子,并进行验证.结果表明:质粒pSCU207通过大肠杆菌与小单孢菌新鲜菌丝之间接合转移导入小单孢菌中,并可稳定遗传;大肠杆菌与小单孢菌新鲜菌丝之间的最佳接合转移体积是40μL和400 μL.
小单孢菌、接合转移、质粒pSCU207、抗生素的敏感性、质粒稳定性
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Q933(微生物学)
国家自然科学基金项目31070087,30570046;湖北省自然科学基金重点项目2011CDA079;湖北省烟草公司面上项目0710XYYC2012-01;国家大学生创新创业训练项目GCX13104;“十二五”中南民族大学国家级民族药学实验教学中心建设项目
2015-06-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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