嗜水气单胞菌气溶素的原核表达及其多克隆抗血清的制备

摘要：

根据GenBank中致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)气溶素(aerolysin,Aer)基因的序列设计引物,以来自湖北的鱼源A.hydrophila分离株为模板扩增出aer基因的ORF序列,克隆到pMD18-T载体上进行序列测定.测序结果表明,A.h ydrophila的aer基因的系统进化树中国内菌株聚为一支,国外菌株聚为一支.通过pET-32a(+)载体构建Ah15株aer基因的表达载体pET32a-15,转化大肠杆菌BL21 (DE3) pLysS中进行诱导表达,通过SDS-PAGE分析,显示与预期大小约72.2 ku相吻合的融合蛋白带,且以包涵体形式存在.浓缩后的包涵体蛋白免疫新西兰大白兔获得了重组蛋白的抗血清,Western blot结果显示,兔抗血清可以识别A.hydrophila的重组毒素,说明该基因的重组蛋白具有很好的免疫原性,可作为A.hydrophila基因工程疫苗研制的候选基因.

关键词：嗜水气单胞菌、气溶素、原核表达、多克隆抗血清

所属期刊栏目：33

分类号：S917.1(水产基础科学)

资助基金：湖北省杰出青年人才基金项目2011CDA091;中央高校基本科研业务费专项2013PY023,2013PY069,2013PY070,2013PY071

在线出版日期：2014-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：65-71